Openfield 的行為觀(guān)察
一. 通常觀(guān)察嚙齒類(lèi)動(dòng)物在0F中的如下行為:
1-探究行為(explore) 包括用鼻子嗅聞空氣和曠場(chǎng)地板氣味等運動(dòng)行為。該運動(dòng)通常
表現為彎曲的運動(dòng)路線(xiàn),運動(dòng)速度很慢.而且動(dòng)物身體腹部常緊貼著(zhù)曠場(chǎng)地板。
2-走動(dòng)行為(walk) 常表現為較直的運動(dòng)路線(xiàn)和相對較快的活動(dòng)速度,且不用鼻子嗅
聞空氣和曠場(chǎng)地板氣味等運動(dòng)行為。
3.旋轉行為(spinturn) 包括追逐自己尾巴而形成的固定模式的環(huán)繞運動(dòng)。
4·自我梳理行為(selfgroom) 快速清潔面部、前足和身體的行為。典型的完全的梳理
過(guò)程通常開(kāi)始于動(dòng)物輕輕地搔抓面部。動(dòng)作逐漸增多并沿著(zhù)身體向下.終止于尾尖。不論完
全梳理和非完全梳理過(guò)程(常在梳理身體時(shí)中斷)均應被計人“梳理”過(guò)程。
5·坐(sit) 睜著(zhù)眼睛而嗅聞空氣的非運動(dòng)狀態(tài)。定義“坐”的*小非運動(dòng)時(shí)間應為3s。
6.睡眠(sleep) 眼睛緊閉且完全不運動(dòng)狀態(tài)。
7·伸展注意行為(stretchattend) 動(dòng)物伸展身體,特別是從比較**之處(如曠場(chǎng)角落)
向著(zhù)相對較不**之處(曠場(chǎng)中央部分)伸展身體.是動(dòng)物對危險的評價(jià)行為。動(dòng)物腹部保持
平坦緊貼曠場(chǎng)底部,并用鼻子嗅聞空氣和地板氣味。當頭部和前足向前伸展時(shí),后足保持不
動(dòng)一該行為往往結束于前足“后退一步”,從而使身體不再伸展。當進(jìn)行一系列伸展注意行為
時(shí)或者伸展注意行為之后進(jìn)行運動(dòng)活動(dòng)則“后退一步”行為就不完整:在此情況下,應對任何
一次身體完全伸展記數為。伸展注意”行為.
8·返回行為(return) 當進(jìn)行非常慢的探索行為時(shí),動(dòng)物經(jīng)常返回到起點(diǎn)。在整個(gè)過(guò)程
中動(dòng)物腹部緊貼曠場(chǎng)底部保持平坦.
9·后腿站立(rear)動(dòng)物站立.雙前足離開(kāi)地板:沿曠場(chǎng)側壁站立時(shí).動(dòng)物??吭跁鐖?chǎng)
側壁上。
10.gt6(jump)所有四足全部離開(kāi)曠場(chǎng)地板。
通常研究的指標還包括累積運動(dòng)(locomotion)包括探究和走動(dòng)。對于運動(dòng)、走動(dòng)、探索.旋轉、坐、梳理和睡眠等行為.既要記錄行為的發(fā)生頻率(frequency),也要記錄行為的持續時(shí)間(duration),通常記錄5min測試時(shí)間內的發(fā)生頻率和總持續時(shí)間;對于伸展注意、返回行為、后腿站立和跳動(dòng)則僅記錄5rain內的發(fā)生率一同時(shí),還應記錄從動(dòng)物放入OF的一刻起.到所發(fā)生任何一個(gè)行為的潛伏期.OF通常分為5個(gè)部分(圖30一1),按照發(fā)生每個(gè)行為時(shí)所處的位置對每個(gè)行為進(jìn)行打分:
①四角之一(總面積的8.16%):
②四壁之一(40.82%);
③外環(huán)(32.65%):
④內環(huán)(16.33%);
⑤中央(2.04%)。
當動(dòng)物四足全部進(jìn)入圖中某個(gè)領(lǐng)域時(shí)方可認為動(dòng)物已經(jīng)進(jìn)入該領(lǐng)域。由于伸展注意行為是一個(gè)“定向性”的行為,所以不以動(dòng)作發(fā)生時(shí)的位置評分,而以動(dòng)作所指的區域(如伸展注意外環(huán)就是指伸展姿勢由曠場(chǎng)側壁指向外環(huán))。另外,動(dòng)物在曠場(chǎng)角落和沿側壁的時(shí)間總和記作趨觸性總分。
動(dòng)物從放入OF的一刻起的各種潛伏期也可用于評估,如離開(kāi)角落潛伏期、離開(kāi)側壁潛伏期、進(jìn)入內環(huán)潛伏期、進(jìn)入中央潛伏期、后腿站立潛伏期、位于中央時(shí)后腿站立潛伏期、沿側壁后腿站立潛伏期、非趨觸性位置后腿站立潛伏期、自我梳理潛伏期、返回行為潛伏期、走動(dòng)潛伏期、伸展注意潛伏期或伸展注意不同曠場(chǎng)部位的潛伏期等。
動(dòng)物接受不同劑量電離輻射作用后,通過(guò)檢測動(dòng)物在曠場(chǎng)中各種行為指標的變化反映電離輻射對動(dòng)物行為的作用規律。
二、器材
動(dòng)物行為測量和分析自動(dòng)化系統.包括】.0m×1.0m大小的曠場(chǎng)箱、變焦攝像頭、圖像采集卡、計算機、行為測量和分析自動(dòng)化軟件;5%醋酸,
三、方法和步驟
實(shí)驗時(shí),曠場(chǎng)上方的攝像機采集動(dòng)物在曠場(chǎng)中的行為表現,通過(guò)圖像采集卡傳人計算機記錄、存儲并分析。具體過(guò)程如下:
(--)輻射動(dòng)物
成年雄性SD大鼠60只,隨機分為4組,分別受到0、8、20、25Gy的1射線(xiàn)照射,以制備假輻射(OGy)、中度骨髓型放射病(8Gy)、腸型放射病(20Gy)和腦型放射病(25Gv)等動(dòng)物模型。分別于照后即刻、24h、48h對各組動(dòng)物進(jìn)行分組測量,每個(gè)時(shí)問(wèn)點(diǎn)測量每組動(dòng)物5只,每只動(dòng)物僅測量一次。不重復檢測。
(二)曠場(chǎng)測量
1.調整曠場(chǎng)位置,使之位于攝像頭正下方;
2.調整實(shí)驗室內光線(xiàn),使之形成漫反射光.而且曠場(chǎng)內部沒(méi)有較大的反光斑:
3.用5%的醋酸一水溶液清洗曠場(chǎng),使之不殘留其余異味.以后每只動(dòng)物檢測之后均需用5%的醋酸一水溶液清洗曠場(chǎng),以免動(dòng)物之間通過(guò)氣味傳遞信息;
4.將動(dòng)物分別從同一起步點(diǎn)放入曠場(chǎng)箱,進(jìn)入曠場(chǎng)箱后隨其自由活動(dòng),同時(shí)開(kāi)啟行為記錄和分析自動(dòng)化系統程序,通過(guò)計算機記錄動(dòng)物活動(dòng)情況;
5.每只動(dòng)物測量5min,測試每只大鼠后.對每只動(dòng)物的排便情況進(jìn)行記錄和清理,并用5%醋酸徹底清潔實(shí)驗箱;